引起組織壞死,從而導致卵巢功能早衰。技術實現要素:針對上述現有技術,本發明提供了一種利用順鉑建立大鼠卵巢早衰模型的方法。本發明根據“順鉑可誘導卵巢細胞凋亡,引起組織壞死,從而導致卵巢功能早衰”這一原理,使用不同濃度及不同方法建立了化療性損傷卵巢早衰動物模型,并對比各種方法間的優劣性,篩選出順鉑比較好的濃度及給藥時間,為篩選順鉑導致的卵巢早衰動物模型比較好劑量提供了一種操作簡單,成功率高,結果可靠的實驗方法。本發明是通過以下技術方案實現的:一種利用順鉑建立大鼠卵巢早衰模型的方法:將劑量為按體重一日2~3mg/kg的順鉑施用于大鼠,施用方式為腹腔注射,施用方法:連續施用7天,末次注射后第15天,得...
動物模型名稱:膽管結扎致肝膽管性肝硬化大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雄性4、實驗動物年齡:5周5、實驗動物體重:200~220g6、實驗動物環境:SPF級1、實驗方法:用膽管結扎法。大鼠按10mg/kg體重腹腔注射3%戊巴比妥鈉麻醉,腹部皮膚消毒,無菌操作沿腹部正中線剪開腹腔,分離出膽管,在膽管近端和遠端2處結扎膽管。手術后正常飼養28天。28天后解剖取肝臟進行組織病理學檢查。2、檢測標準:肝臟病理切片鏡下小膽管伴纖維組織增生積分按程度為0-3分:0分:無明顯病變;1分:呈局灶性分布,受累面積在30%以下者;2分:呈多灶性分布,受累面積在30%-70%之間者;3分:呈彌漫...
自發性**動物模型:未經人為處理;自然發生;自發性**的總體評價--動物自發性**的病因往往是由動物的遺傳特性決定的與人癢的病因有較大距離。各動物**生長速度差異較大很難在限定時間內獲得大量生長均勻的荷瘤動物(tumor-bearinganimals)。因此,自發性**動物模型很少在抗**藥物的常規篩選中廣泛應用。2、誘發性**動物模型:在實驗條件下:使用致*物(carcinogens);誘發動物發生**animalmodelofinducedtumor)指使用致*因素(carcinogens)在實驗條件下誘發動物發生**的動物模型,它是進行實驗**學研究的常用方法。常用于驗證可疑致*因素的作...
即為本發明構建的一種pirb基因敲入的小鼠動物模型。本發明所采用第二種技術方案的特點還在于,步驟1中得到grna1和grna2后分別與trancrrna在25℃孵育10min形成二級結構。步驟3中grna1、grna2的濃度均為2~10pmol/ul,cas9蛋白的注射濃度為30~100ng/μl。步驟4中southern雜交采用bamhi和avrii核酸內切酶切割f1代雜合子小鼠的dna。本發明的有益效果是:本發明提供了pirb基因敲入的小鼠動物模型及其構建方法,本發明的小鼠動物模型對于pirb基因功能的研究和在體驗證提供了良好的基礎。分離自pirb基因敲入小鼠的細胞還可以用于研究pirb發...
PMID:15082495、7561688)①HE染色②關節側視圖③PCR鑒定、二、糖尿病相關動物模型1.糖尿病***1)模型構建(PMID:30826357)使用鏈佐星(STZ)注射ApoE-/-小鼠,建立糖尿病ApoE-/-小鼠模型,同時與ApoE-/-小鼠采用高脂喂養18周2)模型檢測指標(PMID:29107826、28345659)3)生化指標檢測4)超聲檢測5)主動脈染色檢測2.糖尿病心肌病1)誘發性DCM模型模型構建(PMID:29732743)實驗動物:大鼠方法:各大鼠一次性腹腔注射鏈脲佐菌素150mg·kg-1(STZ用mol·L-1,pH,現配現用),并給予高脂飼料進行喂養...
具體實施方式下面結合附圖和具體實施方式對發明作進一步闡述。本發明構建了pirb基因敲入的小鼠動物模型,將pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的內含子1內。具體來說,構建一個cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒,將其克隆進入rosa26基因的內含子1中。rosa26基因(ncbireferencesequence:)位于小鼠的七號染色體。本發明pirb基因敲入的小鼠動物模型的構建方法,具體按照以下步驟具體實施:步驟1、根據小鼠rosa26基因(genebank:))序列,利用cas-desigher軟件在...
在一個具體實施方式中,壓迫元件采用黃銅和鋅的混合物制備而成。具體地,混合物為h62黃銅,即含銅量為%~%,余量為鋅含量的黃銅。而銅、鋅皆屬于非鐵磁性物質。在另一個具體實施方式中,壓迫元件采用聚乳酸(polylactic,pla)制備而成。pla是一種無毒無刺激的合成高分子材料,其原料是乳酸,不含任何金屬。h62黃銅棒或pla棒在體內,即不會受磁療、電療引起的磁場、電場干擾,也不會對磁療、電療儀器及磁共振儀器產生不良影響。得到大鼠慢性背根神經壓迫模型。很多自發性動物模型在研究人類疾病時具有重要的價值。淮安皮膚疾病動物模型建模其可與dna鏈交叉連接,顯示出細胞毒作用。溶解后在體內無需載體轉運,即可...
SPF級SD雄性大鼠,體重約200~220g。使用脂多糖(LPS)誘導建立急性肺損傷模型。將大鼠放入固定盒中,用酒精檫拭大鼠尾靜脈后,按壓住尾靜脈1/3處,注射器進針后回抽有血后注入LPS溶液(溶于生理鹽水,給藥劑量10mg/kg),從而建立內性急性肺損傷大鼠模型。對照組的大鼠尾靜脈注射等體積的生理鹽水。5.2模型鑒定及后續檢測:5.2.1肺損傷后的目視觀察:如下圖所示,在急性肺損傷模型小鼠中,肺部有多處明顯滲血,后有肉眼可見肺部大面積出血滲出,可以直觀的反映肺損傷程度。動物模型的意義和優越性!江蘇裸鼠疾病動物模型建?!度祟惣膊游锬P汀窞樯?十一五"規劃教材。為了提高醫學研究生培養質量,編...
圖2是從側面展示的壓迫元件插入椎間孔的結構示意圖。圖3是術后大鼠四肢表現情況。圖4是術后28天大鼠的雙下肢縮足閾值變化曲線圖。圖5是重復經顱磁刺激對大鼠背根神經壓迫模型的影響。具體實施方式以下通過具體的實施例對本發明的技術方案做進一步的描述。以下的實施例是對本發明的進一步說明,而不是限制本發明的范圍。實施例1、模型的制備1、腹腔注射1%戊巴比妥鈉(40mg/kg)麻醉大鼠(220-250g),背部剃毛,碘伏消毒背部皮膚,俯臥位固定于動物手術臺上,鋪無菌巾。2、于大鼠腰4到骶1水平左側作一2-3cm縱行切口,切開皮膚,鈍性分離椎旁肌至橫突上方,暴露腰4椎間孔,腰5椎間孔(椎旁肌可用自制拉鉤保持分...
動物模型名稱:低鐵飼料聯合放血致缺鐵性貧血大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雌性4、實驗動物年齡:初斷乳5、實驗動物體重:50~70g6、實驗動物環境:SPF級1、實驗方法:低鐵飼料聯合放血法誘導。SD大鼠每天給予低鐵飼料和超純水飼養,并每周通過眼底靜脈叢放血1mL,連續3周。2、檢測標準:血紅蛋白含量明顯下降,紅細胞內游離原卟啉明顯升高。1.提供動物模型構建過程中的原始實驗記錄及數據圖片。2.根據要求提供構建成功的模型動物或相關組織材料。上海東寰為您提供完善的小鼠動物疾病模型。虹口區肺病疾病動物模型建模呼吸系統H01代碼下分為18個小類,筆者瀏覽近五年面上項目,大致篩選出各...
f1代小鼠southern印記的5’探針引物如下:primersfor5’probe:5’probeforwardprimer:5’-aaacgtggagtaggcaatacccagg-3’5’probereverseprimer:5’-aaagaagggtcacctcagtctccct-3’primersfor3’probe:3’probeforwardprimer:5’-ttctgggcaggcttaaaggctaac-3’3’probereverseprimer:5’-aggagcgggagaaatggatatgaag-3’southern印記的目標片段大小如下:5’probe-bamh...
水楊酸性胃潰瘍模型:大鼠禁食后水楊酸灌胃。4、結扎幽門法潰瘍模型:大鼠麻醉后在無菌技術下結扎幽門。此模型適合做探索抗潰瘍病藥物研究和胃潰瘍發病機制方面的研究。三、動物模型(animalmodelofhypertension)1、腎動脈狹窄性模型:在腎動脈上造成腎動脈狹窄。如果是單側腎動脈狹窄,則在間隔10~12d后將另一側腎摘除。手術幾天后,血壓開始升高,1~3個月后血壓升至高峰,并可長期維持下去。2、腎外包扎性模型:腎外異物包扎,壓迫腎實質,造成腎組織缺血,使腎素形成增加,血壓上升。3、應激性模型:應激性大鼠模型常采用噪聲和足底電擊的復合刺激,每天2次,每次2h,約20d大鼠可形成人類疾病的...
動物模型名稱:角膜環鉆致角膜損傷兔模型2、實驗動物種屬:新西蘭兔3、實驗動物性別:雌雄不限4、實驗動物年齡:2~3月齡5、實驗動物體重:1.8~2.5kg6、實驗動物環境:SPF級。1、實驗方法:角膜環鉆致兔角膜機械性損傷。耳緣靜脈注射戊巴比妥鈉聯合肌肉注射速眠新Ⅱ進行兔麻醉。環鉆前先用2%硼酸溶液沖洗雙眼,再滴0.25%氯霉素眼藥水2滴消毒,以保持結膜清潔。開瞼,滴2%利多卡因滴眼液2滴行角膜表面麻醉,用已滅菌的6mm角膜環鉆分別在兔眼角膜上作環切,并滴入2滴氯霉素眼藥水潤洗,用顯微眼鑷、角膜上皮鏟和精細眼剪小心去掉角膜損傷區域上皮,術畢,滴氯霉素眼藥水2滴。2、檢測標準:肉眼或裂隙燈下觀察...
動物模型的優越性主要表現在以下幾下方面。(一)避免了在人身上進行實驗所帶來的風險臨床上對外傷、中毒、腫痛病因等研究是有一定困難的,甚至是不可能的,如急性和慢性呼吸系統疾病研究進很難重復環境污染的作用。輻射對機體的損傷也不可能在人身上反復實驗。而動物可以作為人類的替難者,在人為設計的實驗條件下反復觀察和研究。因此,應用動物模型,除了能克服在人類研究中經常會遇到的理論和社會限制外,還容許采用某些不能應用于人類的方法學途徑,甚至為了研究需要可以損傷動物組織、或處死動物。(二)臨床上平時不易見到的疾病可用動物隨時復制出來臨床上平時很難收集到放射病、毒氣中毒、烈性傳染病等病人,而實驗室可以根據研究目的要...
機械通氣致肺損傷模型實驗動物:兔子、大鼠獲得方式:使用呼吸機,予以特定的通氣模式(例如:大鼠接受20mL/Kg的潮氣量、85次/min的呼吸頻率2h)模型特點:急性肺損傷病理特征之一的透明膜常出現于大型的實驗動物模型,而在大鼠或小鼠中很少出現,因此進行機械通氣致肺損傷造模動物的選擇需要謹慎。2.吸入性急性肺損傷模型實驗動物:小鼠、大鼠、兔子造模試劑:煙霧、空氣污染物及有害氣體、脂多糖、活菌獲得方式:通過吸入、氣管內滴入或靜脈滴注脂多糖、活菌、煙霧、有害化學試劑及氣體等導致肺必須真正了解研究者感興趣且需要的小鼠疾病模型。松江區哪一家疾病動物模型建模動物模型編輯添加義項名B添加義項?所屬類別:經濟...
pirb的功能和下游抑制性信號通路仍然未被闡明,因此迫切需要pirb的細胞和動物模型。目前對于pirb基因功能的研究,多采用可溶性的pirb的胞外段(pirbextracellularpeptide,pep)和抑制劑,或者采用慢病毒轉染。前者受到是否能夠透過血腦屏障和抑制劑效率的影響,后者慢病毒轉染在原代細胞和在體的轉染效率比較低,使研究pirb的功能受到極大的限制。為解決這些問題,我們通過crispr/cas9技術建立了pirb基因敲入小鼠,將pirb基因敲入c57bl/6j的rosa26位點,為研究pirb在免疫系統或者神經系統的作用和機制提供了很好的工具。技術實現要素:本發明的目的在于提...
缺點:該移植模型的原發出現與轉移發生之間時間間隔短,不利于藥物藥效研究;且細胞為鼠源,與人類有一定的差異。2異種移植模型異種移植模型是將人類的細胞或組織移植入免疫缺陷型實驗動物體內。此模型一般采用免疫缺陷型小鼠,例如無胸腺裸鼠、CB17-SCID小鼠、NOD/SCID小鼠、NSG小鼠。一般來說,免疫缺陷程度越高,成瘤性越好。的相關研究中,人源細胞系異種移植(cell-line-derivedxenograft,CDX)模型和患者組織異種移植(patient-derivedxenograft,PDX)模型已得到廣泛應用。CDX模型方法:將5×106的人A375黑色素瘤細胞皮下注射NOD/SCID...
f1代小鼠southern印記的5’探針引物如下:primersfor5’probe:5’probeforwardprimer:5’-aaacgtggagtaggcaatacccagg-3’5’probereverseprimer:5’-aaagaagggtcacctcagtctccct-3’primersfor3’probe:3’probeforwardprimer:5’-ttctgggcaggcttaaaggctaac-3’3’probereverseprimer:5’-aggagcgggagaaatggatatgaag-3’southern印記的目標片段大小如下:5’probe-bamh...
pirb的功能和下游抑制性信號通路仍然未被闡明,因此迫切需要pirb的細胞和動物模型。目前對于pirb基因功能的研究,多采用可溶性的pirb的胞外段(pirbextracellularpeptide,pep)和抑制劑,或者采用慢病毒轉染。前者受到是否能夠透過血腦屏障和抑制劑效率的影響,后者慢病毒轉染在原代細胞和在體的轉染效率比較低,使研究pirb的功能受到極大的限制。為解決這些問題,我們通過crispr/cas9技術建立了pirb基因敲入小鼠,將pirb基因敲入c57bl/6j的rosa26位點,為研究pirb在免疫系統或者神經系統的作用和機制提供了很好的工具。技術實現要素:本發明的目的在于提...
水楊酸性胃潰瘍模型:大鼠禁食后水楊酸灌胃。4、結扎幽門法潰瘍模型:大鼠麻醉后在無菌技術下結扎幽門。此模型適合做探索抗潰瘍病藥物研究和胃潰瘍發病機制方面的研究。三、動物模型(animalmodelofhypertension)1、腎動脈狹窄性模型:在腎動脈上造成腎動脈狹窄。如果是單側腎動脈狹窄,則在間隔10~12d后將另一側腎摘除。手術幾天后,血壓開始升高,1~3個月后血壓升至高峰,并可長期維持下去。2、腎外包扎性模型:腎外異物包扎,壓迫腎實質,造成腎組織缺血,使腎素形成增加,血壓上升。3、應激性模型:應激性大鼠模型常采用噪聲和足底電擊的復合刺激,每天2次,每次2h,約20d大鼠可形成廣泛應用于...
空白組卵巢內細胞形態完整,可見各級卵泡生長活躍,并大多數為原始卵泡,卵泡顆粒層較多,黃體發育好。4mg、6mg組(***、八天給藥)有炎性細胞浸潤,各級卵泡減少,閉鎖卵泡增加。2mg組(連續給藥7天)可見很少次各級卵泡,及成熟卵泡,大多數為閉鎖卵泡,卵泡顆粒層變薄,黃體明顯減少。結論:使用%氯化鈉溶液及10mg的醫用順鉑(齊魯制藥)配制成2mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg連續腹腔注射7天,造模效果比較好。根據實驗結果得出:本發明可對比不同劑量順鉑、不同給藥時間的卵巢早衰造模方法,從而有效的確定大鼠卵巢模型建立方案。給本領域技術人員提供上述實施例,以完全公開和描述如何實施和使用所主張的實...
急性肺損傷模型大鼠(右圖)與對照組大鼠(左圖)肺組織HE染色6.模型又名支氣管。支氣管是由多種細胞及細胞組分參與的慢性氣道炎癥,此種炎癥常伴隨引起氣道反應性增高,導致反復發作的喘息、氣促、胸悶和/或咳嗽等癥狀,多在夜間和/或凌晨發生,此類癥狀常伴有而多變的氣流阻塞,可以自行或通過而逆轉。6.1小鼠模型建立SPF級Balb/c雌性小鼠,體重約20g。采用OVA致敏誘導建立模型。OVA致敏誘導的模型:分別于第1、8、15天腹腔注射OVA混懸液(含OVA1g/L,氫氧化鋁5g/L)0.2ml,實驗第21天起將小鼠置于霧化激發器內,給予2%OVA生理鹽水霧化激發大鼠疾病建模請找上海東寰。泰州疾病動物模...
2mg組、4mg組、6mg組lh水平均上升,同樣,只有2mg組有明顯升高(p<),如圖3所示。表3表4②體重變化:(mean±sd),如圖4所示:2mg組(連續注射7天)與空白組相比,大鼠體重***下降(p<,注射第2天開始)。3mg組(連續注射7天)與空白組相比,大鼠體重***下降(p<,注射第4天開始),直至第12天*存活1只大鼠。4mg、6mg組(第1、8天注射)與空白組相比,大鼠體重分別在***次及第二次注射后的有***下降(p<),4mg組體重在停止給藥后4天與空白組無差異。③卵巢重量:如表5、圖5所示,2mg、6mg組大鼠在經過順鉑注射后卵巢重量相比對照組,都有不同程度縮減,其中2...
其可與dna鏈交叉連接,顯示出細胞毒作用。溶解后在體內無需載體轉運,即可通過帶電的細胞膜。由于細胞內氯離子濃度低(4mmol/l),氯離子為水所取代,電荷呈陽性,具有類似烷化劑雙功能基團的作用,可與細胞核內dna的堿基結合,形成三種形式的交聯,造成dna損傷,破壞dna復制和轉錄,高濃度時也抑制rna及蛋白質的合成。順鉑又稱順氯氨鉑、氯氨鉑、ddp、錫鉑,是目前常用的金屬鉑類絡合物,在分子中鉑原子對其抗**作用有重要意義。但只有順式才有意義,反式無效。其可與dna鏈交叉連接,顯示出細胞毒作用。溶解后在體內無需載體轉運,即可通過帶電的細胞膜。疾病動物模型建模廠家。泰州呼吸疾病動物模型建模其中可以...
無縫克隆的原理:在載體末端和引物末端應具有15-25個同源堿基(同源臂)。通過T5核酸外切酶、DNA聚合酶、DNA連接酶,三種酶同時發揮功能,從而達到單片段或多片段與載體連接的技術。T5核酸外切酶:5‘→3’端消化DNA片段,形成粘性末端;DNA聚合酶:填補缺口;DNA連接酶:兩條DNA單鏈黏合起來。無縫克隆的特點傳統分子克隆無縫克隆傳統分子克隆和無縫克隆對比:單次插入片段:傳統分子克隆一輪只能插入一個片段;無縫克隆單個至多個(≤5)。受限于酶切位點:傳統分子克隆是;無縫克隆不是。引入多余序列:傳統分子克隆是;無縫克隆不是。流程&操作時間:傳統分子克隆流程繁瑣,時間長。無縫克隆流程簡單,時間短...
2mg組、4mg組、6mg組lh水平均上升,同樣,只有2mg組有明顯升高(p<),如圖3所示。表3表4②體重變化:(mean±sd),如圖4所示:2mg組(連續注射7天)與空白組相比,大鼠體重***下降(p<,注射第2天開始)。3mg組(連續注射7天)與空白組相比,大鼠體重***下降(p<,注射第4天開始),直至第12天*存活1只大鼠。4mg、6mg組(第1、8天注射)與空白組相比,大鼠體重分別在***次及第二次注射后的有***下降(p<),4mg組體重在停止給藥后4天與空白組無差異。③卵巢重量:如表5、圖5所示,2mg、6mg組大鼠在經過順鉑注射后卵巢重量相比對照組,都有不同程度縮減,其中2...
2mg組、4mg組、6mg組lh水平均上升,同樣,只有2mg組有明顯升高(p<),如圖3所示。表3表4②體重變化:(mean±sd),如圖4所示:2mg組(連續注射7天)與空白組相比,大鼠體重***下降(p<,注射第2天開始)。3mg組(連續注射7天)與空白組相比,大鼠體重***下降(p<,注射第4天開始),直至第12天*存活1只大鼠。4mg、6mg組(第1、8天注射)與空白組相比,大鼠體重分別在***次及第二次注射后的有***下降(p<),4mg組體重在停止給藥后4天與空白組無差異。③卵巢重量:如表5、圖5所示,2mg、6mg組大鼠在經過順鉑注射后卵巢重量相比對照組,都有不同程度縮減,其中2...
無論是學術大牛還是科研小白,在接觸一個新課題時,往往是三個步驟:首先,閱讀大量相關文獻,設計出自己的實驗方案。然后,摸索預實驗,獲得一些經驗和數據。根據這些資料,決定是否推進正式試驗。其中,很重要的預實驗不僅能節約實驗經費,減少人力物力支出,重要的是,能讓你在做正式試驗時「手兒不抖,穩如老狗」。因此,給大家分享一下如何摸索自己的預實驗。首先,預實驗必須要當做正式實驗來對待(態度要放端正,這是必須的)。預實驗的每一步都需要詳細規劃,多方籌謀。不論是實驗動物的選擇,還是檢測試劑的購買,都盡量和正式實驗統一標準。建議大家先把所有試劑和藥物購買完畢后,再去購買實驗動物。因為動物會長胖,長胖后給藥劑量就...
2mg組、4mg組、6mg組lh水平均上升,同樣,只有2mg組有明顯升高(p<),如圖3所示。表3表4②體重變化:(mean±sd),如圖4所示:2mg組(連續注射7天)與空白組相比,大鼠體重***下降(p<,注射第2天開始)。3mg組(連續注射7天)與空白組相比,大鼠體重***下降(p<,注射第4天開始),直至第12天*存活1只大鼠。4mg、6mg組(第1、8天注射)與空白組相比,大鼠體重分別在***次及第二次注射后的有***下降(p<),4mg組體重在停止給藥后4天與空白組無差異。③卵巢重量:如表5、圖5所示,2mg、6mg組大鼠在經過順鉑注射后卵巢重量相比對照組,都有不同程度縮減,其中2...
目前鑒定出15個外顯子,外顯子1起始密碼為atg,外顯子15的終止密碼子是tga(轉錄本:)。pirb蛋白屬于i型跨膜糖蛋白,包含由六個免疫球蛋白樣結構域(domain,d)組成(d1-d6)的胞外段,一個疏水的跨膜段,三個免疫受體酪氨酸依賴的抑制序列(immunoreceptortyrosinebasedinhibitorymotifs,itims)和一個itims樣序列組成的胞內段。理論上講,pirb的分子量約為92kd,但是western-blot分析中,pirb經常位于105kd處,因為pirb是糖蛋白。以往研究發現,pirb在免疫系統和中樞調節中均發揮重要作用。在免疫系統中,pirb...