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上海咨詢EdU細胞增殖檢測試劑盒

來源: 發布時間:2025-04-03

該產品是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EdU后進行細胞涂片處理,固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。也可以應用于流式細胞儀檢測。建議染色完成后立即進行熒光顯微鏡拍照觀察;如果條件限制,請于4°C條件下避光濕潤保存3天之內完成拍照。若為細胞爬片或涂片,可使用抗熒光淬滅封片劑進行封片后于4°C條件下保存及拍照檢測。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性,只需溫和的細胞固定化和透化處理,能夠較好地保護細胞形態、DNA整體結構及細胞內抗原識別位點,操作步驟更加快速、靈敏和準確。EdU細胞增殖檢測試劑盒的發展趨勢如何?上海咨詢EdU細胞增殖檢測試劑盒

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細胞增殖是評價細胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標。EdU(5-Ethynyl-2′-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,其連有的炔烴基團在天然化合物中很少見,能夠在細胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)摻入正在復制的DNA分子中,通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應,把記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進行高效快速的檢測出DNA復制活性,廣泛應用于細胞增殖、細胞分化、生長與發育、DNA損傷修復等方面的研究。傳統的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法需要DNA變性、抗原修復、抗原抗體過夜孵育等復雜繁瑣的操作步驟。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性,只需溫和的細胞固定化和透化處理,能夠較好地保護細胞形態、DNA整體結構及細胞內抗原識別位點,操作步驟更加快速、靈敏和準確。河南品質好的EdU細胞增殖檢測試劑盒說明書使用EdU細胞增殖檢測試劑盒的好處有哪些?

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細胞增殖分析是細胞生長和分化研究的關鍵,在藥物開發階段常用來評估化學藥物的毒性和對細胞生長的控制作用。經過之后的細胞分裂階段,各個子代細胞會從母細胞中接收到大約一半的熒光染料。采用流式細胞儀對熒光強度進行分析,即可測定出自標記結合起,單個細胞或細胞群所經歷的傳代數目。通常根據平均DNA含量或細胞代謝參數進行細胞增殖檢測,此類分析可以報告出總細胞數目和活細胞數目,或者測定出單個細胞內的DNA合成情況。細胞增殖染料稀釋分析主要基于細胞膜通透性,熒光團分子、染料進入細胞后,將會共價結合到蛋白質上的氨基基團上,從而使染料能夠長時間停留在細胞中。

本試劑盒包含EdU法檢測所需要的所有組份,同時提供了藍色細胞核染料Hoechst33342,可以用來復染所有細胞核,也可用于細胞周期分析。使用本試劑盒所做結果可以用熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡、流式細胞儀或熒光酶標儀進行檢測,也可以用于高內涵篩選(High-ContentScreening,HCS)。對6孔板培養的細胞(每孔500μl的Click反應液)、96孔板培養的細胞(每孔50μl的Click反應液)、每管細胞數量為10-100萬的流式細胞儀檢測(每管500μl的Click反應液)以及冰凍或石蠟切片的檢測(每個樣品100-200μl的Click反應液)EdU細胞增殖檢測試劑盒常見的用途有哪些?上海東寰告訴您。

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按照以下的表格進行染色反應液的配制:染色反應液組分500μl1ml2ml5ml1×反應緩沖液430μl860μlmlml催化劑溶液20μl40μl80μl200μlTAMRA紅色熒光溶液μlμl5μlμl緩沖添加劑50μl100μl200μl500μl3、每孔加入100μl配置好的檢測混合液,以覆蓋細胞為宜,避光、室溫孵育30分鐘;4、棄染色反應液,加入100μlTritonX-100細胞滲透液清洗2-3次,每次10分鐘;5、棄細胞滲透液,用PBS洗兩次,每次5分鐘。DNA染色1、將Hoechst33342用RNase-free水溶液1:1000進行稀釋得到終濃度為5μg/ml的1×Hoechst染色液;2、每孔加入100μl1×Hoechst染色液,室溫避光孵育20-30分鐘后,棄染色液;3、每孔加入100μlPBS洗細胞兩次,去掉洗液。圖像獲取及分析建議染色完成后立即進行熒光顯微鏡拍照觀察;如果條件限制,請于4°C條件下避光濕潤保存3天之內完成拍照。若為細胞爬片或涂片,可使用抗熒光淬滅封片劑進行封片后于4°C條件下保存及拍照檢測。EdU細胞增殖檢測試劑盒的作用是什么?上海東寰告訴您。江蘇正規EdU細胞增殖檢測試劑盒價格

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EdU與胸腺嘧啶(T)結構非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細胞內很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應,能在細胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復制活性。本試劑盒可以檢測到細胞或組織樣品中單個的增殖細胞,同時也可以對細胞或組織樣品總體的細胞增殖情況進行定量檢測。本試劑盒可以檢測培養的細胞或組織樣品,也可以檢測組織切片,但均需提前進行EdU的摻入。細胞增殖能力的檢測是評估細胞活性、基因毒性和抗藥物效果等的基本方法上海咨詢EdU細胞增殖檢測試劑盒

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