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單分子技術(shù)數(shù)字ELISA試劑盒

來源: 發(fā)布時間:2025-12-14

芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品

每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測

人類形式的蛋白質(zhì)被加入到25%牛血清中以代替臨床測試樣本;通常使用四倍稀釋因子以減少免疫測定中的基質(zhì)效應(yīng)4。使用數(shù)字ELISA檢測25%血清中的PSA,從該實驗中確定了LOD為~50aM(1.5fg/mL),相當(dāng)于整個血清中的LOD為~200aM(6fg/mL)。檢測到的比較低濃度為250aM,相當(dāng)于25%血清中的1fMin全血清。由于LOD是通過外推背景濃度來確定的加上背景的三個標(biāo)準(zhǔn)差,不同運行的LOD取決于背景的CV。在具有典型背景方差的幾個實驗中,全血清PSA的亞飛摩爾LOD得以保持。相比之下,一種前列的商業(yè)PSA檢測方法(ADVIACentaur,西門子)報告在人血清中的LOD為3pM(0.1ng/mL),并且已經(jīng)報道了LOD在10-30fM17,26。 芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA, 極速檢測,快15min能完成 的ELISA檢測!單分子技術(shù)數(shù)字ELISA試劑盒

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POCT芯片的即時診斷革新:芯棄疾POCT芯片采用卡片式設(shè)計(尺寸8×5cm),集成8個檢測通道,搭配全自動加樣儀(加樣精度±0.1μL)與便攜式熒光掃描儀(分辨率5μm),實現(xiàn)“樣本進(jìn)-結(jié)果出”的15分鐘極速檢測。其**性能媲美化學(xué)發(fā)光,如超敏肌鈣蛋白T(hs-cTnT)檢測限達(dá)10pg/mL(線性范圍0-1000pg/mL),可在急診科快速鑒別心肌梗死(閾值>14pg/mL)。在膿毒癥管理中,PCT與IL-6聯(lián)合檢測靈敏度達(dá)95%,較單一指標(biāo)提升20%。芯片操作全程自動化,醫(yī)護(hù)人員*需加載樣本即可完成檢測,無需復(fù)雜培訓(xùn)。在基層醫(yī)療場景中,該技術(shù)已應(yīng)用于核酸快檢(靈敏度98%)、流感分型(A/B型同步檢測)及糖尿病酮癥酸中毒(β-羥丁酸檢測)等場景,檢測時間從2小時縮短至15分鐘,誤診率降低至5%以下。單分子技術(shù)數(shù)字ELISA檢測用時芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA,人人都用能得起的單分子檢測;

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動力學(xué)上,對于200,000個微球分散在100μL中,珠子之間的平均距離約為80μm。大小為TNF-α和PSA(分別為17.3和30kDa)的蛋白質(zhì)將在不到1min的時間內(nèi)擴(kuò)散80μm。表明,在2小時的孵育過程中,蛋白質(zhì)分子的捕獲不會受到限制動力學(xué)上。其次,必須有足夠的珠子被加載到陣列上以限制泊松噪聲。200,000個珠子加載到50,000孔陣列中,通常會導(dǎo)致20,000–30,000個微球被困在1mL孔中。對于典型的背景信號為1%活性微球(見下文),這種裝載導(dǎo)致背景信號為200-300個活性微球檢測到,對應(yīng)于泊松噪聲的可接受變異系數(shù)(CV)為6-7%。第三,過高的微球濃度可能導(dǎo)致:a)非特異性結(jié)合增加,降低信噪比;以及b)分析物與微球的比例過低,導(dǎo)致活性微球的比例過低,從而導(dǎo)致泊松噪聲引起的高CV。這些因素的平衡NatBiotechnol.作者手稿;可在PMC2010年12月1日獲得。Rissin等人第5頁因素意味著每100μLoftest樣品含有20萬到100萬顆珠子是比較好的數(shù)字ELISA。同時,為了獲得可接受的背景信號(1%)和泊松噪聲)。

抗體配對篩選的成本與效率優(yōu)化,抗體篩選芯片通過高密度檢測區(qū)設(shè)計與微量樣本技術(shù),大幅降低抗體開發(fā)的時間與物料成本。傳統(tǒng)方法中,49種抗體配對需多次實驗,耗時數(shù)天且消耗數(shù)百微升樣本;而芯片技術(shù)*需1小時、5μl樣本即可完成初步篩選,成本降低70%以上。其單通道多指標(biāo)并行檢測能力,支持不同反應(yīng)條件(如pH、溫度)的同步測試,快速篩選出比較好配對組合。在**標(biāo)志物抗體開發(fā)中,該芯片可同時評估親和力、特異性與交叉反應(yīng)性,加速診斷試劑盒的研發(fā)進(jìn)程,尤其適合初創(chuàng)企業(yè)與科研機(jī)構(gòu)的高效篩選需求,推動抗體工程從試錯性實驗向精細(xì)化篩選轉(zhuǎn)型。單分子陣列化結(jié)構(gòu)使每個磁珠成為反應(yīng)單元,放大信號,降低檢測下限。

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數(shù)字ELISA測量蛋白質(zhì)濃度遠(yuǎn)低于傳統(tǒng)ELISA的能力源于兩種效應(yīng):

1)SiMoA對酶標(biāo)記的高度敏感性;以及2)通過數(shù)字化蛋白質(zhì)檢測可以實現(xiàn)的低背景信號。任何免疫測定的靈敏度由其靈敏度決定。檢測技術(shù)到標(biāo)簽,抗體親和力,試驗背景,以及背景測量值的變異(%CV)27.SiMoA對酶非常敏感標(biāo)簽

2)為在數(shù)字ELISA中檢測亞飛摩爾濃度的標(biāo)記蛋白提供了基礎(chǔ)。也就是說,對于給定親和力的抗體,其靈敏度為免疫測定將由測定背景決定,SiMoA的高標(biāo)記靈敏度有助于降低這種背景。對照實驗表明,數(shù)字ELISA的背景來自于檢測抗體和酶的非特異性結(jié)合(NSB)與捕獲珠表面結(jié)合(補(bǔ)充表2)。AsSiMoA相比傳統(tǒng)檢測方法具有更高的標(biāo)記靈敏度,明顯減少了檢測抗體(~1nM)和酶標(biāo)記物(1–50pM)的需要,以檢測結(jié)合事件,與傳統(tǒng)方法相比(標(biāo)記試劑濃度~10nM)。降低的標(biāo)記物濃度減少了NSB到捕獲表面,從而導(dǎo)致背景信號明顯降低。 芯棄疾JX-8B單分子小型化ELISA檢測產(chǎn)品,多重檢測,同一樣本就能測試2-6項指標(biāo);醫(yī)學(xué)實驗室數(shù)字ELISA

芯棄疾JX-8B單分子普惠化ELISA檢測產(chǎn)品,超敏檢測,理論可達(dá)飛克級;單分子技術(shù)數(shù)字ELISA試劑盒

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單分子的檢測原理:由Simoa數(shù)字免疫分析法實現(xiàn)的超靈敏度已在先前討論過。簡而言之,類似免疫分析中的酶-底物反應(yīng)是在相對較大的反應(yīng)體積(50-100μL)中進(jìn)行的,在信號生成步驟中稀釋了產(chǎn)物分子。信號分子的擴(kuò)散和稀釋將靈敏度限制在皮摩爾范圍內(nèi)。相比之下,Simoa通過將單獨標(biāo)記的免疫復(fù)合物和底物限制在飛升大小的孔中,從而限制了熒光產(chǎn)物分子從酶-底物反應(yīng)中的擴(kuò)散。當(dāng)單一酶標(biāo)簽催化底物轉(zhuǎn)化為熒光產(chǎn)物時,產(chǎn)生的熒光團(tuán)被限制在孔中,從而在短時間內(nèi)產(chǎn)生可測量的熒光信號。 單分子技術(shù)數(shù)字ELISA試劑盒

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