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動(dòng)物模型有助于認(rèn)識(shí)疾病的本質(zhì)在臨床上研究疾病的本質(zhì)難免帶有一定局限性。許多病原體除人以外也能引起多種動(dòng)物的感,其癥狀體征表現(xiàn)可能不完全相同。但是通過對(duì)人畜共患病的比較,則可以充分認(rèn)識(shí)同一病原體給不同機(jī)體帶來的各種危害,使研究工作上升到立體的水平來揭示某種疾病的本質(zhì)。因此,一個(gè)好的疾病模型應(yīng)具有以下特點(diǎn):①再現(xiàn)性好,應(yīng)再現(xiàn)所要研究的人類疾病,動(dòng)物疾病表現(xiàn)應(yīng)與人類疾病相似。②動(dòng)物背景資料完整,生命周期滿足實(shí)驗(yàn)需要。③復(fù)制率高。④專一性好,即一種方法只能復(fù)制出一種模型。應(yīng)該指出,任何一種動(dòng)物模動(dòng)物模型的優(yōu)越性主要表現(xiàn)在以下幾下方面。北京實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型服務(wù)

脂多糖致膿毒血癥肝損傷小鼠模型【方法】1、小鼠稱重,按體重計(jì)算藥物用量。2、脂多糖(LPS)藥物配制,生理鹽水溶解,根據(jù)小鼠體重配制終濃度為10mg/kg,200ul/只腹腔注射使用。3、抓取小鼠,捏緊小鼠頸背部皮膚,小拇指無(wú)名指疊加固定小鼠左下肢充分暴露小鼠腹部。4、小鼠的頭部向下,這樣腹腔中的就會(huì)自然倒向胸部,防止注射器刺入時(shí)損傷腸道。進(jìn)針的動(dòng)作要輕乘,防止刺傷腹部。5、注射器吸取準(zhǔn)備好的藥物,腹腔左下部與身體呈45度角左右斜角進(jìn)針注射LPS,注射完藥物后,輕微旋轉(zhuǎn)針頭退針,防止漏液。6、造模18h后處死小鼠解剖取組織進(jìn)行組織病理學(xué)檢查?!緳z測(cè)】肝組織有無(wú):1、肝水腫;2、肝出血;3、炎性細(xì)胞浸潤(rùn);4、肝組織腫大等病理改變。再觀察肝損傷程度,各按程度積分為:0分為無(wú)該項(xiàng)病理改變;1分為病理變化輕且很局限;2分為病理變化中等且局限;3分為病變中等但或局部很;4分為非常的理改變。求出各動(dòng)物的各項(xiàng)病理改變的總和,作為肝損傷程度積分。高脂高糖動(dòng)物模型培養(yǎng)通過阿霉素(Adriamycin,ADR)腹腔注射給藥(Adriamycin,ADR)試圖造成小鼠心衰。

brain:腦組織;liver:肝臟;retina:視網(wǎng)膜,intestine:腸;muscle:肌肉;heart:心臟;kidney:腎臟;spleen:脾;b:圖1中a的統(tǒng)計(jì)結(jié)果;c:westernblot檢測(cè)gm20541蛋白在不同組織的表達(dá);d:圖1中c的統(tǒng)計(jì)結(jié)果。圖2:gm20541基因敲除小鼠的構(gòu)建路線;圖中sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠;ctr是指野生型;het是指雜合子。圖3:中長(zhǎng)距離pcr鑒定子一代鼠的結(jié)果;圖中:a:擴(kuò)增5’端長(zhǎng)臂使用引物對(duì)gm5’lrf和sa3’r,擴(kuò)增產(chǎn)物為;其中a2,3,6,9,10,b1為陽(yáng)性;b:擴(kuò)增3’端長(zhǎng)臂使用引物對(duì)neof和gm3’lrr,擴(kuò)增產(chǎn)物為。其中:a2,3,6,9,10,b6,9,es1g,es2g為陽(yáng)性雜合子,+/+為野生型對(duì)照。圖4:gm20541基因敲除小鼠的鑒定;a:gm20541基因敲除小鼠的基因型鑒定結(jié)果;b:實(shí)時(shí)定量pcr實(shí)驗(yàn)分析gm20541敲除小鼠視網(wǎng)膜中基因敲除效率,證明gm20541在敲除小鼠視網(wǎng)膜中不再表達(dá);sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠;ctr是指野生型;het是指雜合子。圖5:暗適應(yīng)視網(wǎng)膜電圖(electroretinogram,erg)檢測(cè)結(jié)果;圖中:a-c:不同光強(qiáng)下gm20541基因敲除小鼠的暗適應(yīng)視網(wǎng)膜電圖軌跡圖;d:不同光強(qiáng)下gm20541基因敲除小鼠的暗適應(yīng)視網(wǎng)膜電圖a波統(tǒng)計(jì)。
實(shí)驗(yàn)試劑DSS、水2、試劑配制稱取一定量的DSS,使用水溶解,配置成2%-5%(w:v)的DSS水溶液,DSS溶液配制好完成后可在4℃避光保存。3、造模動(dòng)物按照體重隨機(jī)分組后,將動(dòng)物水瓶?jī)?nèi)的水溶液更換為DSS水溶液,按照5ml/只*天進(jìn)行準(zhǔn)備,隔兩天后更換新的DSS溶液(DSS給藥時(shí)為day1,在day3、day5更換DSS溶液),第8天將DSS溶液更換為不含DSS的清水,清水?dāng)z取持續(xù)14天后,重復(fù)前面的步驟2-3次,造模后持續(xù)觀察動(dòng)物狀態(tài),通過DAI評(píng)分判定動(dòng)物成模情況。可以克服人類某些疾病潛伏期長(zhǎng),病程長(zhǎng)和發(fā)病率低的缺點(diǎn)。

特發(fā)性肺纖維化(IPF)小鼠模型建立【方法】1、BALB/c小鼠麻醉,6-8周齡,體重20~25g,仰臥固定于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,頸部去毛后酒精消毒,切開皮膚,逐層暴露氣管;2、將1mL注射器經(jīng)兩氣管軟骨環(huán)間隙朝向心端刺入氣管,回抽無(wú)阻力;3、注入博萊霉素(約4~5mg/kg)再向氣管內(nèi)注入~3次,使藥物在肺部分布均勻;4、以大鼠身體長(zhǎng)軸為中心,正反快速旋轉(zhuǎn)鼠板1~2分鐘。縫合皮膚,局部聚維酮碘消毒(或用青霉素消毒)防止,室溫保持在24~25℃,待動(dòng)物自然清醒后置籠內(nèi)常規(guī)飼養(yǎng)。肺纖維化模型發(fā)展時(shí)間:2周可見肺系數(shù)(肺重/體重×100%)、羥脯氨酸含量明顯升高。顯微鏡下可見炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),以淋巴細(xì)胞、單核吞噬細(xì)胞為主,并有肺泡壁增厚、成纖維細(xì)胞增生等Ⅱ級(jí)肺泡炎表現(xiàn)。4周可見肺間質(zhì)內(nèi)有大量散在綠染的膠原纖維,肺泡結(jié)構(gòu)破壞,見有許多纖維細(xì)胞等Ⅲ級(jí)肺間質(zhì)纖維化病變。大鼠模型病理組織學(xué)與病理生理學(xué)改變與人類肺間質(zhì)纖維化相似。其病變?cè)缙诒憩F(xiàn)為滲出性肺泡炎,炎癥細(xì)胞在病變處聚集增多。晚期為肺間質(zhì)纖維化,間質(zhì)細(xì)胞增生,基質(zhì)膠原聚集取代正常的肺組織結(jié)構(gòu)?!緳z測(cè)】組織病理切片HE染色。四氯化碳誘導(dǎo)急性肝損傷大鼠模型。北京實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型服務(wù)
可以嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件,增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)材料的可比性。北京實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型服務(wù)
所述高原光照環(huán)境模擬裝置15包括可見暖光系統(tǒng)和照明亮度無(wú)極控制系統(tǒng),所述可見暖光系統(tǒng)設(shè)置飼養(yǎng)倉(cāng)2頂部。本實(shí)施例的工作原理:本系統(tǒng)集成了可見暖光系統(tǒng)(可模擬高原紅外線和紫外線)與照明亮度無(wú)極控制系統(tǒng),需要燈光時(shí),可通過燈光系統(tǒng)開啟紫外燈以及照明燈,并可根據(jù)所需實(shí)現(xiàn)亮度調(diào)節(jié),通過日光燈加紫外線燈來實(shí)現(xiàn)高原高紫外線光照環(huán)境。實(shí)施例5在實(shí)施例1的基礎(chǔ)上提供的一種高原性人類疾病模型制備環(huán)境模擬系統(tǒng),所述高原溫度環(huán)境模擬裝置16包括降溫系統(tǒng)、升溫系統(tǒng)、溫控系統(tǒng)和溫度采集顯示系統(tǒng)。本實(shí)施例的工作原理:本系統(tǒng)配置降溫系統(tǒng)、升溫系統(tǒng)、溫控系統(tǒng)與溫度采集顯示系統(tǒng)使系統(tǒng)內(nèi)溫度可無(wú)極調(diào)控,以保障海拔(3000m~7000m)高原溫度環(huán)境進(jìn)行模擬,溫度調(diào)節(jié)通過冷暖風(fēng)機(jī)來實(shí)現(xiàn),就是和空調(diào)一樣的原理。實(shí)施例6在實(shí)施例1的基礎(chǔ)上提供的一種高原性人類疾病模型制備環(huán)境模擬系統(tǒng),所述高原濕度環(huán)境模擬裝置17包括加濕系統(tǒng)、除濕系統(tǒng)、濕度控制系統(tǒng)和濕度采集顯示系統(tǒng)。本實(shí)施例的工作原理:本系統(tǒng)配置加濕系統(tǒng)、除濕系統(tǒng)、濕度控制系統(tǒng)與濕度采集顯示系統(tǒng)使系統(tǒng)內(nèi)濕度可無(wú)極調(diào)控,以保障海拔(3000m~7000m)高原濕度環(huán)境進(jìn)行模擬。北京實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型服務(wù)