HE染色石蠟和冰凍切片樣本的處理，樣品處理：a.對于石蠟切片:二甲苯中脫蠟5-10分鐘;換用新鮮的二甲苯，再脫蠟5-10分鐘;無水乙醇5分鐘;90%乙醇2分;70%乙醇2分鐘;蒸餾水2分鐘.b.對于冰凍切片：蒸餾水2分鐘。c對于培養細胞：用4%多聚甲醛固定10分鐘以上。蒸餾水洗滌2分鐘。換用新鮮的蒸餾水，再洗滌2分鐘。蘇木素伊紅(HE)染色對于上述處理好的樣品：蘇木素染色液染色5-10分鐘(可以根據染色結果和要求調整時間)。浸自來水中沖洗去多余的染色液，約10分鐘。蒸餾水再洗滌一遍(數秒鐘)。95%乙醇5秒。伊紅染色液染色30秒-2分鐘(可以根據染色結果和要求調整時間)。此時，如果需要直接觀察，可以用70%乙醇洗滌2次。如需脫水、透明后封片按后續步驟進行，70%乙醇洗滌后仍可按照后續步驟進行脫水、透明和封片處理。南京英瀚斯，專業的技術提供專業的HE染色服務。貴州比較好的HE染色

HE染色常見問題：切片染色不均勻，有片狀的弱著**存在答：（1）取材時組織太厚，固定過久，導致深部組織固定不佳，而表淺組織過度固定，而透明、脫水、浸蠟均是如此，這樣在后期染色時就會出現染色不均勻。應該將厚的組織剖開固定。（2）制片過程有問題，切片厚薄不一，或者有刀痕，或組織與玻片間存在氣泡。同一張切片厚薄不一，一般都是在制片時，刀片固定不佳或刀片鈍或刀片與組織角度不佳（一般比較好角度為5°）（3）脫蠟前未烘烤，脫蠟時間過短或脫蠟液使用過久，導致脫蠟不徹底。（4）染色液過少，著色不均勻；或染色時部分組織干涸而另一部分濕潤，這樣會導致組織吸附染料的能力不一。（5）分化不當。南京英瀚斯，專業的病理染色實驗服務平臺。新疆推薦的HE染色公司腎臟組織HE染色如何觀察。

HE染色注意事項：1、染色時調節pH值很重要。如果組織塊在福爾馬林中固定時間長，組織酸化而影響細胞核著色。因此，要在自來水中沖洗時間長一些或在飽和碳酸鋰水溶液中處理10-30min，這樣可以使細胞核著色較深。染伊紅時胞漿著色不佳，可在伊紅溶液中滴加1-2滴冰醋酸。2、切片染蘇木精后，分色這一步是關鍵，應在顯微鏡下控制進行，一般以細胞核染色清楚（晰）而細胞質基本無色為佳。如果過分延長分色時間將導致染色太淺，應重新染色后再行分色。3、切片經酒精脫水后，入二甲苯時可出現白色不透明狀態，此為脫水不徹底，應將切片退回無水酒精，更換酒精、二甲苯，以求徹底脫水與透明。4、在染色過程中不要讓切片干燥，以免切片收縮、變形，影響神經元形態。5、切片從二甲苯取出或進入二甲苯前，切片周邊均應擦干凈或吸干多余水分。6、***封固時，要用中性樹脂，防止日后褪色，蓋片要選大于組織塊的面積，如漏出一部分不久將會褪色，所用樹脂濃度要適當，樹脂封固時不能有氣泡。

HE染色原理1、細胞核染色的原理：蘇木精為堿性天然染料，可使細胞核著色。細胞核內染色質的成分主要是DNA，在DNA的雙螺旋結構中，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外，使DNA雙螺旋的外側帶負電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木精堿性燃料以離子鍵或氫鍵結合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍色，所以細胞核被染成藍色。2、細胞漿染色的原理：伊紅是一種化學合成的酸性染料，在一定條件下可使細胞漿著色。細胞漿的主要成分是蛋白質，為兩性化合物，細胞漿的染色與染液的pH在胞漿蛋白質等電點（4.7—5.0）以下時，胞漿蛋白質以堿式電離，則細胞漿帶正電荷，就可被帶負電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負電荷的陰離子，與胞漿蛋白質帶正電荷的陽離子結合，使細胞漿著色，呈現紅色。HE染色原理 試劑 染色步驟 注意事項 。

HE染色知識點1：對送檢組織標本的要求送檢組織標本在手術切除或活檢后應當立即放入4%中性緩沖甲醛溶液中固定。尸檢標本應當盡量在死亡后盡早取材固定。送檢組織需要全部取材的，應當在送檢單上注明，有特殊要求（如細菌培養、解釋道化學分析等）應當事先聯系，并且在標本未固定前進行處理。知識點2：組織取材要求在對送檢組織標本進行詳細檢查的基礎上，根據診斷的需要，確定取材的部位和塊數。切取的組織應當按照不同的部位分別給予不同的編號或標記，以便鏡檢時核對。另外，盡可能在取材前對有意義的標本的表面及剖面鏡下攝影，并編號存檔南京英瀚斯，專業的病理染色實驗服務平臺。冰凍切片是否可以做HE染色？質量好的HE染色哪家好

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HE染色細胞質過染分析及應對原因：（1）伊紅染色液濃度太高，特別是焰紅燃料、四溴四氯熒光素鈉的存在；（2）切片在伊紅染色時間過長；（3）切片在伊紅染色后經乙醇脫水步驟時過的太快，而使乙醇分化伊紅的作用不能產生。對策：適當稀釋伊紅染色液，減少伊紅染色時間，或者使切片在乙醇脫水等步驟時，停留時間相對均勻。同樣，也要檢查切片的厚度是否合適。切片中出現藍黑色沉淀物分析及應對原因：蘇木精染色液中的金屬膜，黏附在玻片上。對策：每天染色前仔細過濾蘇木精染色液，或建議使用半氧化蘇木精染色液，如Gill蘇木精染色液,可以避免過多的金屬膜產生。貴州比較好的HE染色

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