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湖南細胞免疫組化注意事項

來源: 發布時間:2021-10-25

免疫組化技術有哪些應用?

定位和定性是免疫組化比較大的優勢。相比于其他蛋白檢測方法,免疫組化具有定位較直接準確、定性靈敏度高,是定位檢測分析優先方法,尤其對于有些因子的轉位研究十分有用。免疫組織化學的臨床應用主要包括以下幾方面:惡性**的診斷與鑒別定性;確定轉移性惡性**的原發部位;對某類**進行進一步的病理分型;軟組織**診斷;為臨床提供治療方案的選擇;近年來,隨著免疫組織化學技術的發展和各種特異性抗體的出現,使許多疑難**得到了明確診斷。免疫組化在**診斷和鑒別診斷中的實用價值受到了普遍的認可,其在低分化或未分化**的鑒別診斷時,準確率可達50%-75%。


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免疫組化技術應用于臨床cancer良惡性的判斷,英瀚斯生物為您介紹。對于反應性增生還是cancer性增生,可用免疫球蛋白(Ig)的輕鏈抗體檢測B淋巴細胞增生的單克隆或多克隆性來區別。在濾泡反應性增生時,濾泡反應中心的細胞不表達細胞凋亡蛋白(bcl-2),bcl-2陰性;而在濾泡性淋巴瘤中,由于90%以上cancer性濾泡細胞有bcl-2的高表達,bcl-2陽性。而增殖細胞核抗原(PCNA),周期素(Cycling),核抗原(Ki-67)通過對cancer細胞增生的程度作出評價,從而提示增生細胞的良惡性。山西動物組織免疫組化哪家好英瀚斯生物實驗外包,多種病理染色熟練掌握,可做免疫組化!

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免疫組化的局限性,可能會有假陽性。陽性信號定位不正確即為假陽性,包括著色不勻、背景著色、邊緣效應,另外組織的某些特定成分也能導致假陽性結果。假陽性可能的原因有:(1)一抗濃度及一抗是否失效,抗體有一個合適的濃度范圍且必須在有效期內使用,過期的抗體或者不著色,或者背景著色,形成假陽性;(2)試劑未充分覆蓋組織,組織邊緣的試劑易干濃度較組織中間高致深染;(3)抗體孵育時間過長,由于室溫的影響夏季孵育時間稍短,冬季孵育時間稍長;(4)操作過程中組織變干,造成組織邊緣收縮或損壞形成偽影,產生假陽性;(5)3,3'-二氨基聯苯胺(DAB)顯色時間太長,DAB宜現配現用,配制時間比較好在30min以內;(6)由于胞漿里含有較多的蛋白質,因此間質和胞漿中出現很多非特異性的染色,如內源性酶血紅蛋白、肌紅蛋白等造成的著色,可以通過血清封閉解決;乳腺cancer組織中的脂肪細胞、淋巴細胞也會產生非特異性的染色;(7)非特異性抗體吸附常見于壞死組織中,使壞死組織呈較高的背景染色,在免疫組化中應避免選擇壞死組織較多的蠟塊。

免疫組化指的是根據抗體與抗原特異結合的原理來檢測組織切片中的抗原(如蛋白)。immuno的詞根來自操作中所使用的抗體,而histo意味著組織。另一種類似的技術是免疫細胞化學(Immunocytochemistry,簡稱ICC)。這兩個詞大家經常混著用,看著好像差不多,但實際上還是有點區別。IHCvsICC對于IHC,組織是來自患者或動物,經過冷凍或石蠟包埋。將這些組織制成約4μm厚的切片,封片后再處理。通過這種方法,研究人員可觀察細胞組分的定位,同時維持周圍組織的原先結構。對于ICC,大部分細胞外基質及其他基質組分被去除,只剩下整個細胞來染色。ICC的來源可以是細胞懸液,來自患者或動物(如血涂片、拭子等),或在實驗室中進行的組織培養細胞系。 有沒有推薦的免疫組化外包公司?

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免疫組化在什么情況下進行組織抗原修復,抗原修復的條件是什么? 

(1)由于組織中部分抗原在甲醛或多聚甲醛固定過程中,發生了蛋白之間交聯及醛基的封閉作用,從而失去抗原性。通過抗原修復,使得細胞內抗原決定族重新暴露,提高抗原檢測率。

(2)修復方法從強到弱一般分為三種,高壓修復、微波修復、胰酶修復。修復液也分為若干種(具體的可以查閱相關資料,大量的:中性的、高pH的等)。

(3)微波修復,我們一般用6min*4次,效果不錯。

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關于免疫組化,抗體和抗原之間的結合具有高度的特異性,免疫組織化學正是利用了這一原理。先將組織或細胞中的某種化學物質提取出來,以此作為抗原或半抗原,通過免疫動物后獲得特異性的抗體,再以此抗體去探測組織或細胞中的同類的抗原物質。由于抗原與抗體的復合物是無色的,因此還必須借助于組織化學的方法將抗原抗體結合的部位顯示出來,以其達到對組織或細胞中的未知抗原進行定性,定位或定量的研究。南京英瀚斯生物科技有限公司有設計免疫組化的實驗哦!如果您對此有希望了解更多,可以與我們聯系!湖南細胞免疫組化注意事項

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