熱遷移分析(Cellular Thermal Shift Assay, CETSA)是一種研究靶點與藥物在細胞水平結(jié)合情況的技術(shù)。其原理是藥物結(jié)合會改變靶蛋白的熱穩(wěn)定性。傳統(tǒng)的CETSA依賴蛋白質(zhì)印跡法檢測,通量低。現(xiàn)在,通過與均相發(fā)光免疫檢測(如Alpha)結(jié)合,開發(fā)出了均相CETSA(簡稱CETSA® HT)。該方法將細胞在不同溫度下加熱后裂解,使用針對目標蛋白的抗體對(偶聯(lián)Alpha供體/受體珠)檢測溶液中剩余的未聚集的天然蛋白量。通過比較藥物處理組與對照組的蛋白熱穩(wěn)定性曲線偏移,即可高通量地確認化合物是否與細胞內(nèi)靶點結(jié)合,并評估結(jié)合強度。均相化學發(fā)光在全球體外診斷市場的競爭態(tài)勢如何?江蘇CRET技術(shù)均相發(fā)光應用領(lǐng)域

均相發(fā)光技術(shù)比較明顯的優(yōu)勢是其操作的極度簡便性所帶來的高通量檢測能力。由于摒棄了所有分離步驟,典型的均相發(fā)光檢測只需將樣本、識別元件(如抗體)和發(fā)光試劑依次加入微孔板中,混合孵育后即可直接讀數(shù)。這種“加樣-孵育-檢測”的模式,將復雜的多步流程簡化為一步或兩步,不僅大幅縮短了檢測時間(通常可在幾分鐘到一小時內(nèi)完成),還大限度地減少了人為操作誤差和交叉污染的風險。這一特性使其完美適配現(xiàn)代自動化液體處理系統(tǒng)和多通道檢測儀,能夠輕松實現(xiàn)每天處理數(shù)萬甚至數(shù)十萬個樣本的超高通量篩選,在藥物發(fā)現(xiàn)、功能基因組學等需要海量數(shù)據(jù)積累的領(lǐng)域具有不可替代的價值。江蘇均相發(fā)光與普通發(fā)光的區(qū)別浦光生物均相化學發(fā)光技術(shù)在免疫檢測中的應用有哪些創(chuàng)新點?

激酶是重要的藥物靶點,其活性檢測是藥物篩選的關(guān)鍵。均相發(fā)光技術(shù),尤其是TR-FRET和Alpha技術(shù),為此提供了理想平臺。以TR-FRET為例:將待測激酶、底物肽、ATP與待篩選化合物共同孵育。體系中包含兩種抗體,一種針對磷酸化底物(帶供體標記),另一種針對底物肽的標簽(帶受體標記)。只有當激酶活性正常,底物被磷酸化后,兩個抗體才能同時結(jié)合到底物肽上,使供受體靠近產(chǎn)生FRET信號。若化合物能抑制激酶,則磷酸化水平下降,F(xiàn)RET信號減弱。這種方法無需分離,可直接在含有ATP、激酶和化合物的混合液中實時或終點法檢測,通量極高,是發(fā)現(xiàn)激酶抑制劑的主流手段。
離子通道和轉(zhuǎn)運體是重要的藥物靶點,但傳統(tǒng)電生理方法通量極低。基于化學發(fā)光的離子敏炎癥料或蛋白,為高通量篩選提供了可能。例如,使用對鈣離子敏感的水母發(fā)光蛋白(Aequorin)或基于熒光素酶的鈣指示劑(如Photina)。當離子通道開放引起離子內(nèi)流時,會觸發(fā)這些蛋白的化學發(fā)光反應。將穩(wěn)定表達該報告系統(tǒng)和目標離子通道的細胞系用于篩選,加入化合物后直接測量發(fā)光信號變化,即可高通量地發(fā)現(xiàn)通道的激動劑或阻斷劑。類似原理也可用于鈉、鉀等離子通道或某些轉(zhuǎn)運體的功能研究。均相化學發(fā)光技術(shù)的未來發(fā)展趨勢是什么?

高通量均相發(fā)光篩選可產(chǎn)生海量數(shù)據(jù)。人工智能(AI)和機器學習(ML)算法可以深入挖掘這些數(shù)據(jù)中的隱藏模式。例如,在藥物篩選中,AI可以分析不同化合物結(jié)構(gòu)與其在多種均相檢測(針對不同靶點或毒性指標)中活性譜的關(guān)聯(lián),預測化合物的作用機制或潛在毒性。AI還可以用于優(yōu)化檢測條件,識別和排除實驗中的異常值或干擾因素,提高數(shù)據(jù)質(zhì)量和篩選結(jié)果的可靠性。隨著AI技術(shù)的發(fā)展,其在均相發(fā)光數(shù)據(jù)解析和決策支持中的作用將愈發(fā)關(guān)鍵。精確檢測,一步到位!均相化學發(fā)光,助您輕松獲得可靠結(jié)果!山東干式化學發(fā)光均相發(fā)光的原理
浦光生物凍干試劑,靈敏度高,特異性強,實驗結(jié)果更可靠!江蘇CRET技術(shù)均相發(fā)光應用領(lǐng)域
均相發(fā)光是一種先進的生物化學檢測技術(shù),其關(guān)鍵特征在于整個檢測反應過程均在均一的液相中進行,無需任何固相分離步驟(如洗滌、離心)。 它通過巧妙的設計,將待測物的特異性識別事件(如抗原-抗體結(jié)合、酶-底物反應)直接轉(zhuǎn)化為可檢測的光信號。 實現(xiàn)這一目標的關(guān)鍵在于依賴能量轉(zhuǎn)移、空間位阻改變或化學環(huán)境變化等機制,使信號分子(供體)與淬滅分子(受體)或發(fā)光底物在結(jié)合事件發(fā)生前后,其相互作用效率發(fā)生明顯改變,從而導致發(fā)光信號的增強或猝滅。與傳統(tǒng)的異相免疫分析(如ELISA)相比,均相發(fā)光技術(shù)具有操作簡便、通量高、易于自動化、試劑消耗少、檢測速度快等突出優(yōu)點,極大地推動了高通量藥物篩選、臨床診斷和基礎生命科學研究的發(fā)展。江蘇CRET技術(shù)均相發(fā)光應用領(lǐng)域